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Nº 9 – Año 2020 IDITEC ISSN: 2525-1597

Además, los seres humanos pueden influir en las especies microbianas que se encuentran en las
superficies a través del uso de ciertos antimicrobianos en particular sobre la resistencia de los mismos
(Fahimipour et al., 2018). Estudios recientes se han abocado a dilucidar la composición de los
microbiomas a fin de entender la relación entre ellos y la salud humana. Estos se centran en estudiar la
metagenómica especialmente con técnicas de secuenciación avanzadas como NGS, (Next Generation
Sequencing) (Zingg et al., 2019). Al presente, son pocos los estudios tendientes a analizar las
comunidades microbiológicas desarrolladas in-situ en los ámbitos asistenciales y no hay estudios
referidos a nuestro país. Es de destacar los análisis metagenómicos llevados a cabo en hospitales (Smith et
al., 2013; Willmann et al., 2015; Lax et al., 2017) y ambulancias (O’Hara et al., 2017) en otros países, los
cuales han permitido obtener datos sobre el perfil de la diversidad de microorganismos. Sin embargo, para
poder contextualizar los datos metagenómicos en una estructura de comunidad tridimensional y dinámica
como la que se encuentra en el ambiente original de estas comunidades, resulta de gran utilidad el uso y
desarrollo de métodos imagenológicos de microscopía de alta resolución que aún se encuentra poco
explorado para el estudio in-situ de biofilms de superficies (Knierim et al., 2012).
El objetivo de este trabajo fue explorar el potencial de los métodos de microscopía de alta resolución,
especialmente de microscopía electrónica de barrido, para estudiar los biofilms desarrollados in situ en
superficies de ambientes médicos asistenciales. Particularmente, se estudiaron los biofilms in situ y
microorganismos predominantes en superficies de distintos laboratorios del Banco Central de Sangre “Dr.
César Guerra”, en Tucumán.

MATERIALES Y MÉTODOS
Banco de Sangre
En este trabajo se estudiaron muestras obtenidas del Banco Central de Sangre “Dr. César Guerra”,
dependiente del Programa Integrado de Salud (PRIS-SI.PRO.SA) de la provincia de Tucumán-Argentina.
Constituye el único servicio de salud pública destinado a los procesos de donación, preparación,
almacenamiento y distribución de productos sanguíneos. La sangre entera obtenida de los donantes es
ingresada al servicio de Producción y Fraccionamiento encargado de la elaboración y distribución de los
hemocomponentes (glóbulos rojos, plaquetas, plasma fresco congelado, crioprecipitado y otros). Para
realizar su obtención, el laboratorio consta de centrífugas refrigeradas a 19 ºC (Presvac DP-2065 R Plus).
Las unidades procesadas y estudiadas bajo calificación y control, son enviadas al área de Distribución,
donde se consignará cada componente a ser distribuido a cada servicio de hemoterapia correspondientes a
los hospitales públicos y privados de la provincia, que reciben regularmente componentes de este Banco
de Sangre. Las plaquetas deben conservarse entre 18 °C y 22 °C en agitación constante para no perder
propiedades. Para ello la sala cuenta con agitadores de plaquetas termostatizados a 22 ºC (Presvac AP-48
L). El servicio de Biología Molecular es el encargado de realizar el Screening de ácidos nucleicos de:
Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH), Virus de Hepatitis C (VHC) y Virus de Hepatitis B (VHB).
Para ello cuenta con una plataforma automatizada, guiada por softwares constituida por los siguientes
equipos: Pipeteador Hamilton MICROLAB STAR IVD/STARlet IVD, allí ingresan los tubos con sangre
centrifugada, de los cuales se utiliza el plasma (donde se resuspenden los ácidos nucleicos) para formar
los pooles de muestras (pooles de 6 o de 1, según corresponda la corrida diaria). Equipo COBAS®
AmpliPrep, que es en donde se realiza la mix de PCR real time para cada uno de los pooles y finalmente
un Analizador COBAS® TaqMan®, con 4 termocicladores seteados que lleva na cabo la PCR real time
que permite detectar la presencia o no de ácidos nucleicos virales en función a los controles internos y
externos.

Muestreo
Se seleccionaron tres áreas en particular a partir de las cuales se definieron los sitios de muestreo: el
servicio de Producción, el servicio de Distribución de hemocomponentes y el servicio de Biología
Molecular. Se tomaron muestras por duplicado del aire acondicionado (AAC-PRO), de la mesada de
trabajo (M-PRO) y de la centrífuga (E-PRO) del laboratorio de Producción. Del agitador de plaquetas que
se encuentra en el área de distribución (A-Plaq-PRO). Del equipo de aire acondicionado (AA-BM),
mesada de reactivos (MR-BM), mesadas de trabajo (ME-BM) y equipos Cobas 201s Roche (E-BM) del
laboratorio de Biología Molecular. Todas las muestras fueron obtenidas y procesadas de acuerdo a los
estándares de bioseguridad correspondientes. Para el muestreo se utilizó cinta de papel e hisopos estériles.
Se empleó el lado que contiene pegamento de las cintas para colectar los posibles microorganismos de las
superficies de los sectores definidos y luego fueron colocadas en tubos eppendorf conteniendo fijador
Karnovsky (Glutaraldehído 1,7 % y Paraformaldehído 2,7 % en Buffer fosfato) a pH 7,2 durante 24 h.
De los mismos sitios en estudio se colectaron muestras empleando un hisopo estéril y a continuación se
realizó la siembra en cajas de Petri estériles conteniendo medio rico Luria–Bertani (LB) sólido, (Triptona
1%, NaCL 1 %, Extracto de levadura 0,5 % y agar 1,5 %) a pH 7. Cada muestra fue sembrada en dos

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